其他沙门菌感染(参考内科学)
不同类型沙门氏菌有哪些检查方式
2021-05-08 11:30:27
肠胃炎型可以通过从呕吐物、粪便、可疑食物中培养、来分离致病菌。其中鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、牛沙门氏菌和鸭沙门氏菌较为常见。研究表明,直肠拭子培养的阳性率较高。伤寒、败血症可以从血液中培养出、分离的病原体。在某些情况下,可以通过培养、从局部化脓性病变或分泌物中分离出病原菌。对于急性胃肠炎患者,其粪便标本可同时接种在强选择性SS琼脂培养基和弱选择性麦康凯培养基上。在37过夜后,挑出不发酵乳糖的可疑菌落,接种在铁三糖培养基上进行培养和血清分型。对于接受过抗菌药物治疗或处于疾病晚期的患者,由于其粪便中沙门氏菌的数量较少,上述直接培养方法有时会导致假阴性结果。为了提高培养的阳性率,可以用0.5%亚硒酸盐肉汤或四氨基磺酸盐肉汤作为增菌剂,将1g左右的粪便标本接种到10ml增菌剂中,37保存过夜,然后移植到上述培养基中培养。北京防疫站介绍,用磷酸盐缓冲蛋白胨水作为富集培养基。接种后,样品在37培养5 ~ 6h,可达到明显的富集效果。不同血清型的沙门氏菌在各种选择性富集培养基中的生长能力差异很大。目前还没有理想的富集培养基,各种沙门氏菌都可以在其中达到富集效果。如0.5%亚硒酸肉汤可增加鼠伤寒沙门氏菌、、副伤寒沙门氏菌B等的生长。但能抑制猪霍乱沙门氏菌、、流产沙门氏菌等的生长。在选择性富集培养中,培养温度升高,达到43℃,培养18~24h,除伤寒沙门菌外,一般都能明显增强增菌培养基的选择效果,对大肠杆菌、变形杆菌、假单胞菌和不发酵乳糖的非致病菌都有较强的抑制作用,使在培养平板上出现较纯的菌落,更易于作进一步菌种分离与鉴定。从血液、尿液和脓液等标本中分离沙门菌的方法与从粪便标本中分离沙门菌的方法基本相同。自血液中分离沙门菌可抽取病人的静脉血5ml,立即接种于50~100ml的0.5%~1%葡萄糖胆汁肉汤或葡萄糖肉汤增菌液中,置37℃培养,每天用铂金环挑取增菌液接种于选择性培养基或血液琼脂培养基上,一般连续接种3天,必要时可连续接种2周。自尿液、痰液、浆膜腔液、脓液中分离沙门菌,可先将标本离心,3000r/min,15min,取沉淀作直接培养分离或经增菌培养后再作分离培养。国内外用于分离沙门菌的培养基种类很多,但均无法从菌落形态上将沙门菌属与变形杆菌属、枸橼酸杆菌属识别开来。邓涤夷等研制了一种新的沙门菌分离培养基,乳糖赖氨酸十二烷基硫酸钠琼脂Ⅱ(LLSⅡ)培养基。沙门菌(除甲型副伤寒沙门菌外)均能在该培养基上生长,并能形成中心黑色边缘红色或橙黄色特征性菌落,而变形杆菌属和枸橼酸杆菌属的细菌因产生硫化氢(H2S)的特征被抑制而形成黄色菌落,因而,从菌落形态上就可以把干扰沙门菌分离的产生硫化氢的非沙门菌区分开来。沙门菌的鉴定较为复杂。目前世界上已发现2000多个血清型,我国已发现201个血清型,新的血清型还在不断地被发现。常先用抗血清作“O”抗原鉴定,再用抗血清作“H”抗原鉴定。近年来,还用噬菌体裂解试验、DNA杂交和聚合酶链反应(PCR)等技术作沙门菌的血清型鉴定。
血清学检查:可用患者的血清与已知的沙门菌菌种制成的菌体抗原或亚单位抗原作凝集试验或酶联免疫吸附试验(ELISA),以检测血清中是否含有特异性抗体。一般于发病1~2周后即出现较高的抗体效价。若双份血清检查,第2次效价有4倍或以上增高者,可明确诊断为本病。但是,由于一般临床检验室的沙门菌抗原种类有限,故较易出现漏检现象。作某种沙门菌特异性抗原检测更有助于明确诊断。如Keller等建立了2株能分泌肠炎沙门菌IgG抗体的小鼠杂交瘤细胞,用制备的单克隆抗体作ELISA,检测标本中的肠炎沙门菌,具特异性强、敏感度高之优点。标本中只要有10条病原菌即可呈检测阳性。
分子生物学检测:近年来,已有用DNA探针和PCR检测沙门菌DNA的报道。而且,初步显示PCR检测有较高的特异性和敏感度。